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GenView cck8试剂盒说明书现货

人阅读 发布时间:2024-04-25 16:29

CCK-8试剂盒可用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。

Cell Counting Kit-8 简称CCK-8,是一种广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。
CCK-8基于WST-8,与MTT类似,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原
生成橙黄色的formazan。对于同样的细胞,颜色的深浅与细胞的增殖成正比,与细胞毒性成反比。
使用酶标仪在450nm波长处测定OD值,间接反映活细胞数量。

酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。CCK-8对细胞无明显毒性。加入CCK-8显色后,
可以在不同时间反复用酶标仪读板,使检测时间更加灵活,便于找到最佳测定时间。
CCK-8优势:
1、使用方便,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂;
2、能快速检测;
3、检测灵敏度很高;
4、重复性优于MTT 法;
5、对细胞毒性小;
6、即用型溶液,无需配置,使用方便。
注意事项
1、使用标准96孔板时,通常细胞增殖实验每孔加入2,000个细胞/100ul培养基,细胞毒性实验每孔加入
5,000个细胞/100ul培养基(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素决定。
按照实验需要,进行培养并给予0-10ul特定的药物刺激。
2、酚红和血清对CCK-8法的检测不会造成干扰,可以通过减去空白孔中本底的吸光度而消除。
3、CCK-8试剂的颜色为淡红色,与含酚红的培养基颜色接近,不注意的话容易产生漏加或多加。
4、CCK-8可以检测大肠杆菌,但不能检测酵母细胞。在细胞增殖实验每次测定的过程中需要避免细菌污染,
以免影响结果
5、当在培养箱内培养时,培养板最外一圈的孔容易干燥挥发,导致体积不准确而增加误差。一般情况下,
最外一圈的孔只加培养基,不作为测定孔用。
6、在培养基中加入CCK-8,培养一定的时间,测定450nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验时,
还应考虑药物的吸收,可在加入药物的培养基中加入CCK-8,培养一定的时间,测定450nm的吸光度作为空白对照。
7、金属对CCK-8显色有影响:终浓度为1mM的氯化亚铅、LV化铁、 铜会5%、15%、90%的抑制显色反应,
使灵敏度降低。如果终浓度是10mM,将会100%抑制显色反应。
8、部分悬浮细胞由于染色比较困难,一般需要增加细胞数量并延长培养时间。

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