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热启动RAPA3G DNA聚合酶

人阅读 发布时间:2022-05-19 20:23

Hotstart RAPA3G DNA Polymerase为第三代DNA聚合酶,具有5'-3'外切酶活性,不具有3'-5’外切酶活性,其具有最高的杂质耐受性(对乙醇、胍盐、肝素具有极高的耐受性),因此对于纯度较差的DNA模板,该酶仍然可以获得理想的实验结果。
RAPA3G DNA聚合酶为化学法修饰的HotStart版本,其在50℃以下100%无活性,只有95℃条件下加热5min后才能完全恢复酶的活力。因此该系统可以有效抑制非特异性PCR扩增,极大的提高了PCR扩增特异性和灵敏度。该酶配有独特的反应缓冲液,可在宽范围中得到良好的扩增结果、检测灵敏度更高、信号更强。

主要特征

  • 快速扩增:具有6kb/min的扩增能力,1kb片段可在25min内完成扩增.
  • 杂质高耐受性:全血、血清、培养细胞、尿液等样本直接进行PCR扩增,无需核酸纯化。
  • 高特异性:采用HaiGene专有热启动技术,50°C以下无活性,仅有95°C加热5min才能恢复酶活。
  • 长片段扩增:质粒、λ DNA 等简单模板可以有效扩增>20 kb,基因组可以有效扩增>8 kb,cDNA可以有效扩增>8kb。

组分

组分名称 1000U
HotStart RAPA3G DNA Polymerase (10U/μl) 100 μl
5×HotStart RAPA3G Buffer 1 mlx5
100mM Mg2+ 1 ml

RAPA3G DNA聚合酶对抑制物耐受性

SDS 0.01% 胍盐 0.25%
乙醇 5% 全血 15%
肝素 0.1IU/ml 血清 15%
Trizol 0.5% 血浆 2%
血红蛋白 30μM 尿液 5%

50μl体积建议添加的样品量

抗凝全血 2.5 μl 培养细胞 >100个
血清 2.5 μl 组织 0.1mg
尿液 2.5 μl 毛发囊 1-3个
血浆 1 μl gDNA

1-400ng

植物叶片 2mm cDNA 1-400ng
植物粗提物 2-4 μl 质粒 0.1-10ng

单位定义

一个活力单位即在在74°C条件下,30分钟内催化10 nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。

储存

-20℃可保存3年。

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