产品组成：
TTC 试剂                    2x1g
TTC 检测缓冲液    500ml
TTC 反应终止液    100ml
Na2S2O4 粉末    1g
使用说明书    1 份

产品效期：一年

产品说明：
      植物根系是活跃的吸收器官和合成器官，根的生长情况和代谢水平即根系活力直接影响植物地上部的生长和营养状况以及最终产量，是植物生长的重要生理指标之一。 
TTC(2，3，5-氯化三苯基四氮唑)是一种氧化还原物质，是标准氧化电位为 80mV 的氧化还原色素，溶解于水为无色，可以检测根系活力。 
      根系活力检测试剂盒（TTC 法）检测原理是在弱酸性条件下，以TTC 为底物，植物根系中脱氢酶能够还原 TTC 生成红色而不溶于水的三苯基甲腙（TTF），生成的 TTF 比较稳定（不会被空气中的氧自动氧化），于分光光度计处检测 485nm 处吸光度，计算 TTC 还原量，以该还原量表示脱氢酶活性并作为植物根系活力的指标，该试剂盒主要用于测定植物根系中根系活力或脱氢酶活性。 

自备仪器耗材：
仪器：     分光光度计 
             水浴锅 
            移液器 
            研钵或匀浆器 
      
试剂：     蒸馏水 
            乙酸乙酯 
      
耗材：     比色杯 
            离心管或容量瓶 
            滤纸 
            吸头 

使用方法：
使用注意事项：
配制好的TTC  检测缓冲工作液应避光保存；如果见光会变红，影响实验结果；
提高温度可以增加反应速度，但会降低重氮盐的稳定性，所以反应需在相同条件下进行；

一、检测工作液配制：
1.TTC 检测缓冲工作液的配制：
取 1gTTC 完全溶解于 250mlTTC 检测缓冲液中，即为 TTC 检测缓冲工作液。该工作液现配现用，短期 4℃避光保存。

2.TTF 标准工作液的配制：
取 0.25ml 配制好的 TTC 检测缓冲工作液置于 10ml 离心管或容量瓶中，加入少许 Na2S2O4 粉末（一般 2mg 左右，各管量一致），混匀，产生红色的 TTF，用乙酸乙酯补加至 10ml，混匀，该溶液中 TTF 浓度为 100ug/ml。
按下表分别取上述溶液 0.25、0.5、1、1.5、2ml 置于离心管或容量瓶中，用乙酸乙酯补加至 10ml，即获得 TTF 含量为 25ug、50ug、100ug、150ug、200ug 的系列 TTF 标准工作液，TTF 浓度为 2.5ug、5ug、10ug、15ug、20ug/ml。

二、 样本处理
取 0.5g 植物须根系，洗净，用滤纸吸干，完全浸没于 10mlTTC 检测缓冲工作液中，
37℃避光孵育 1h，加入 2mlTTC 终止液；
空白对照：取干净离心管，加入 2mlTTC 终止液和 10ml 乙酸乙酯，37℃避光孵育
1h，以此液作为空白对照。

三、 加样
取出上述根系，滤纸吸干水分，放入研钵或匀浆器中，加入 3~4ml 乙酸乙酯，充分研磨或匀浆，以提取 TTF。把红色提取液（TTF）转移至离心管，并用少量乙酸乙酯把残渣洗涤 2~3 次，再将洗涤液一并转移至离心管，最后补加乙酸乙酯至10ml；

四、 测定：
以空白调零，比色杯光径 1.0cm，以分光光度计或酶标仪测定 485nm 处 TTF 的吸光度。

五、计算
以系列标准溶液 TTF 浓度（2.5ug、5ug、10ug、15ug、20ug/ml）为横坐标，以对应的吸光度为纵坐标，绘制 TTF 标准曲线，根据 TTF 与吸光度计算回归方程，根据回归方程计算出待测样品的四氮唑还原量，即为根系活力或脱氢酶活力。

根系（脱氢酶）活力（mg/g.h）= C x V / (1000 xW x t)

C：根据标准曲线查的的样品提取液TTF含量，ug/ml； 
V：样品提取液总体积，ml；                  
W：植物须根系的重量，g；
t：孵育时间，1h。